تستوسترون به عنوان یک هورمون جنسی مردانه شناخته می‌شود، اما زنان نیز مقادیر کمتری تستوسترون دارند. تستوسترون توسط بیضه، تخمدان و غدد فوق کلیوی ساخته می‌شود. در دوران بلوغ مردان، تستوسترون باعث رشد موهای بدن، رشد ماهیچه‌ها و عمیق شدن صدا می‌شود. در بزرگسالی، میل جنسی را کنترل می‌کند، توده عضلانی را حفظ می‌کند و به ساخت اسپرم کمک می‌کند. در زنان، تستوسترون برای رشد استخوان و ماهیچه‌ها مهم است.

اشکال مختلفی از تستوسترون در خون وجود دارد که ممکن است برای تشخیص برخی مشکلات سلامتی اندازه‌گیری شود. بیشتر تستوسترون به صورت متصل به پروتئین است. این پروتئین‌ها مانع از استفاده بافت از تستوسترون می‌شوند که به کنترل میزان تستوسترون فعال در بدن کمک می‌کند. تستوسترونی که به پروتئین‌ها متصل نیست، تستوسترون آزاد نامیده می‌شود. تستوسترون آزاد روی بافت‌ها تاثیر می‌گذارد.

این آزمایش همچنین به عنوان تومور مارکر برای تومورهای نادر بیضه و تخمدان استفاده می‌شود.